簡單了解鼠抗T2-毒素單克隆抗體的常見問題

　　鼠抗T2-毒素單克隆抗體的常見問題：

　　1.包被抗體或抗原不適，易產(chǎn)生陽性值較小，或產(chǎn)生變異，即跳管現(xiàn)象。

　　2.用抗血清不純化，或純化程度太低的抗體包被，則陽性值較小，或沒有陽性梯度。

　　3.封閉不好或標(biāo)記物過濃可產(chǎn)生對照值較高。

　　制備并鑒定抗T-2毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株，以期為T-2毒素的快速檢測提供有力的抗體工具。方法：采用琥珀酸酐法將T-2毒素活化為T-2HS,T-2HS在DCC與NHS作用下與牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶聯(lián)合成*抗原。以T-2HS-BSA為抗原，免疫BALB/c小鼠，用ELISA篩選、建立分泌抗T-2毒素抗體的雜交瘤細(xì)胞株。測定單抗免疫球蛋白亞類及單抗效價，用間接競爭法檢測單克隆抗體細(xì)胞株的特異性。結(jié)果：建立了1株穩(wěn)定分泌抗T-2毒素抗體的雜交瘤細(xì)胞株T-1B3，該細(xì)胞株所分泌的單隆抗體Ig亞類為IgG1，ELISA檢測結(jié)果表明抗T-2毒素抗體可以與T-2毒素發(fā)生特異性反應(yīng)，工作濃度為1:6.5×104,IC50為3.6ng/ml。該抗體與HT-2毒素的交叉反應(yīng)為65.9%,與黃曲霉毒素?zé)o交叉。結(jié)論：制備出能分泌具有較高特異性和親和力的抗T-2毒素單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。